403-as kutatólabor
Laborvezető: Horváti Kata, Ph.D., Szabó Ildikó, Ph.D.
Cím: Budapest, Pázmány P. sétány 1/A, IV. emelet, 403.
Telefon: 06-1-372-2500/1429
Fax: 06-1-372-2620
A laboratóriumban elsősorban peptidszintézis folyik. Az itt előállított peptideket, illetve konjugátumokat négy kutatási területen alkalmazzuk: (1) szintetikus vakcinák, (2) dendritikus sejtek célzása, (3) irányított célbajuttatás - intracelluláris kórokozók, (4) irányított célbajuttatás - tumorellenes hatású konjugátumok
(1) Olyan betegségekben, ahol a kórokozó nagy antigén-diverzitást, illetve általános változékonyságot mutat (pl. gyorsan mutálódó vírusok, különböző életformát felvenni képes baktériumok) nagy jelentőséggel bírnak az olyan oltóanyagok, melyek egy preparátumban többféle immundetermináns részt is tartalmaznak. Peptid-alapú vakcinákban különböző eredetű epitópokat kombinálhatunk, így kiváltva egy általánosabb, hatékonyabb immunválaszt. A tuberculosis (tbc) kórokozója egy olyan baktérium, mely a fertőzés után ún. dormans állapotban akár évtizedekig is megbújhat az emberi szervezetben. Ez a látens fertőzés az emberiség egyharmadát érinti és komoly népegészségügyi problémákat okoz elsősorban azért, mert a dormans baktérium egyes kórképekben (pl. HIV fertőzés) újra aktiválódhat. A baktérium különböző életciklusaiban termelődött fehérjék T-sejt epitópjait tartalmazó vakcina-jelölteket állítunk ezért elő és többféle formulációban vizsgáljuk ezek immunválasz-kiváltó hatását.
(2) A dendritikus sejtek (DS) professzionális antigén prezentáló sejtek, melyek kulcsszerepet játszanak az antigén-specifikus immunválasz és az immunológiai memória kialakításában, valamint az immuntolerancia fenntartásában. A dendritikus sejtek célzásán alapuló kezelési stratégiáknak ezért igen nagy klinikai jelentősége van. Jelen kutatásban dendritikus sejtek sejtfelszíni struktúráit, receptorait célzó szintetikus peptidek kifejlesztését tervezem. Az irodalomban leírt, fág bemutatás segítségével azonosított szekvenciák peptidkémiai módosításával és a szerkezet-hatás összefüggések tanulmányozásával hatékonyabb molekulákhoz juthatunk. A DS-célzó peptideket olyan nano-vakcinák felszínéhez tervezem kötni, melyek különböző betegségekre (pl. tuberculosis) jellemző antigének konjugátumait tartalmazza. A dendritikus sejtek célzásával a vakcina konstrukciók immunogenitása és hatékonysága fokozható.
(3) Jelenleg klinikumban alkalmazott, illetve újonnan kifejlesztett antimikrobiális szerek hatékony célbajuttatása érhető el peptidkonjugáció segítségével. Sejtpenetráló (CPP) és antimikrobiális (AMP) és receptorspecifikus peptideket alkalmazunk hordozóként különböző kismolekulás hatóanyag számára. A labor feladata a konjugálási technikák kidolgozása és a konjugátumok jellemzése. Mindezek mellett új antimikrobiális peptidek azonosítása és előállítása is kutatási feladatink közé tartozik, ahol célunk a jobb biohasznosíthatóság elérése.
(4) Tumorellenes hatóanyagok irányított célbajuttatása.Ezen peptid alapú konjugátumok a hatóanyagok/dianosztikumok célzott specifikus sejtbejuttatását eredményezik. Hordozó peptidként tumorsejt specifikus receptor ligandum (pl. α-MSH), vagy a tumorsejtek felszínéhez specifikusan kötődni képes peptideket (elsősorban phage display peptidek) alkalmazunk.
Ezen konstrukciók szintézisekor mindenképpen a tumorsejtek pusztulásának fokozását tűzzük ki elsődleges célula mellékhatások csökkentésével
A peptideket szilárdfázisú peptidszintézis módszerével készítjük manuálisan, azonban lehetőség van peptidszintetizátor (Syro) használatára is. A peptideket mind Boc/Bzl, mind Fmoc/tBu stratégia alkalmazásával felépíthetjük. A Boc/Bzl stratégia alkalmazásához rendelkezésre áll egy hidrogén-fluoridos hasításra alkalmas teflon készülék (409. labor). A konjugátumokat általában oldatfázisú konjugációs és ligációs módszerekkel alakítjuk ki. A nyers peptidek és konjugátumok tisztítását HPLC rendszerekkel végezzük (414. labor).
Válogatott közlemények:
1. Horváti K, Pályi B, Henczkó J, Balka Gy, Szabó E, Farkas V, Biri-Kovács B, Szeder B, Fodor K. (2019) A convenient synthetic method to improve immunogenicity of Mycobacterium tuberculosis related T-cell epitope peptides. Vaccines 7(3), 101.
https://doi.org/10.3390/vaccines7030101
2. Horváti K, Gyulai G, Csámpai A, Rohonczy J, Kiss É, Bősze Sz (2018) Surface layer modification of PLGA nanoparticles with targeting peptide: a convenient synthetic route for Pluronic F127 - Tuftsin conjugate. Bioconjugate Chem. 29(5):1495-1499.
https://doi.org/10.1021/acs.bioconjchem.8b00156
3. Horváti K, Bacsa B, Mlinkó T, Szabó N, Hudecz F, Zsila F, Bősze Sz (2017) Comparative analysis of internalisation, haemolytic, cytotoxic and antibacterial effect of membrane-active cationic peptides: aspects of experimental setup. Amino Acids. 49(6):1053-1067.
https://doi.org/10.1007/s00726-017-2402-9
4. Horvati K, Bősze Sz, Gideon HP, Bacsa B, Szabó TG, Goliath R, Rangaka MX, Hudecz F, Wilkinson RJ, Wilkinson KA (2016) Population tailored modification of tuberculosis specific interferon-gamma release assay. J Infection 72:179-188.
https://doi.org/10.1016/j.jinf.2015.10.012
5. Biri-Kovács, B.; Adorján, A.; Szabó, I.; Szeder, B.; Bősze, Sz.; Mező, G. Structure–Activity Relationship of HER2 Receptor Targeting Peptide and Its Derivatives in Targeted Tumor Therapy. Biomolecules 2020, 10(2), 183. https://doi.org/10.3390/biom10020183
6. Szabó, I.; Bősze, S.; Mező, G. Synthesis and in vitro evaluation of drug containing melanoma specific peptide conjugates (Ed.: Mező, G. Eötvös Loránd University, Budapest, Hungary) pp. 39-44 (2020)
Antimikrobiális hatóanyagok
Tumorellenes peptid-konjugátumok
